产品介绍：
Frdbio®小鼠抗体纯化试剂盒用于纯化小鼠血清,腹水和含有鼠源抗体的制品;本试剂盒配备了纯化小鼠抗体所必需预装柱及核心试剂。
本试剂盒中预装柱的填料为Protein G Beads 4FF。主要优势如下：
本蛋白纯化试剂特点：
ØProtein G Beads 4FF可以耐高压,可以在高速流速状态下纯化；
Ø洗脱条件温和，不会对抗体造成损伤；
Ø填料再生简单，反复使用，实验室测试表明再生15次后，Protein G Beads 4FF填料效率没有明显降低。
产品主要参数：
基质：交联度4%琼脂糖凝胶
配体：重组蛋白G
载量：>30 mg Mouse lgG /ml介质
介质微球粒径：45-165um
最大流速：300cm/h
试剂盒已经提供材料：
产品编号 | 预装柱 | 浓缩基础缓冲液（10X） | 洗脱干粉 | 储存缓冲液 |
PPR0027k-1mL | 1mL*2 | 30ml | 1支 | 15ml |
PPR0027k-5mL | 5mL | 30ml*2 | 1支*2 | 30ml |
其他需要自备试剂材料：
² 待纯化抗体样品；
² 移液器及吸头；
² 去离子水；
² 0.22μm或0.45μm滤膜过滤。
产品储存
储存缓冲液：含20%乙醇的1×PBS
储存温度：2-8℃
产品使用操作：
1.使用前准备
1）缓冲液的准备
基础缓冲液:
按照实验所用量，取试剂盒中浓缩基础缓冲液，加入9倍体积的去离子水稀释成基础缓冲液；
洗脱液:
a.试剂盒提供的洗脱干粉用10ml无菌去离子水溶解并混匀，即为10X 洗脱液溶液。配制好的10X 洗脱溶液-20ºC保存，至少一年有效。
b.洗脱缓冲液的配制：a步骤配好的10X洗脱液, 加入9倍体积的去离子水稀释成洗脱缓冲液。配制好的洗脱缓冲液4ºC保存，两周内有效；
缓冲液在使用之前建议用0.22μm或0.45μm滤膜过滤。
2）样品准备样品
使用上述基础缓冲液制备上样样品（细胞/细菌裂解液），样品在上样前用0.22μm或0.45μm滤膜过滤，防止堵塞柱子。
3）Frdbio®Protein G Beads 4FF纯化柱的准备
取出试剂盒中预装柱平衡到室温，打开纯化柱底部开关，用3-5个体积去离子水冲洗柱床，随后用5-10个柱床体积基础缓冲液平衡柱子，确保柱床无气泡。
2.从样品中纯化目标蛋白
1）使用蠕动泵上样或者直接上样（重力法）；
上样量不要超过柱子的结合能力。
2）上样完毕后，用基础缓冲液洗掉未结合的杂蛋白，直到到紫外吸收监测仪达到一个稳定的基线（一般需要10-15个柱体积）；
3）使用洗脱液洗脱目的抗体，顺次接收并做好标记，直到到紫外吸收监测仪达到一个稳定的基线（一般需要5-10个柱体积）；
4）SDS-PAGE检测分析得到的纯化样品（包括流穿组分、洗杂组分和洗脱组分）以及原始样品,纯化样品根据后续实验进行透析浓缩等。
3.纯化柱清洗、再生与保存。
1）5-10倍柱床体积的洗脱缓冲液继续清洗；
2）3倍柱床体积的去离子水清洗；
3）5-10倍柱床体积的0.1M NaOH溶液；
4）3倍柱床体积去离子水清洗后于含20%乙醇的PBS 2-8℃保存。
仅供科研实验使用
