小鼠肾纤维化模型
一．简介：
肾积水（hydronephrosis）是指尿液自肾盂排出受阻，致肾内压力升高、肾盂肾盏扩张，进而引发肾实质萎缩和肾功能进行性减退。梗阻性肾病的主要病理生理改变包括：肾积水、肾盂及肾小管内压力持续升高、肾间质水肿、炎性细胞浸润、成纤维细胞活化增殖、细胞外基质异常沉积及胶原蛋白大量聚集，最终导致肾间质增宽、肾小管萎缩乃至肾单位减少，逐步演变为不可逆的肾间质纤维化和终末期肾功能衰竭。
单侧输尿管梗阻（UUO）是目前公认的肾间质纤维化经典模型。输尿管结扎2周后，患侧肾脏即可出现显著的成纤维细胞增生及间质细胞外基质沉积。需注意的是，由于患侧尿液无法外排，且对侧肾脏发挥代偿作用，模型组血肌酐、尿素氮、NAG及24 h尿蛋白虽明显高于正常组，但仍多处于正常范围之内；与此同时，对侧肾脏无明显病理改变，可作为理想的内部对照。患侧肾脏则表现为大量炎症细胞浸润、肾小管及间质结构严重破坏，并逐步发展为广泛性间质纤维化，而肾小球基本不受累。因此，UUO模型使研究靶点明确集中于肾间质纤维化，有利于深入解析其病变机制及抗纤维化治疗策略的开发验证。
- 材料：
1.货号：DSI519Mu01
2.实验动物：SPF级Balb/C小鼠，雄性，6～8周龄，体重22～25 g。
三．模型制作方法步骤：
本模型通过单侧输尿管结扎诱导小鼠肾间质纤维化，具体操作步骤如下：
1麻醉与备皮：小鼠经3%戊巴比妥钠按80 mg/kg腹腔注射麻醉后，取侧卧位固定，于左侧背部常规脱毛备皮。
2手术暴露：于大腿上方脊柱左侧约1 cm处纵向开口，依次钝性分离皮肤及肌肉层，暴露腹腔。
3输尿管结扎：仔细分离左侧输尿管，于其上1/3处游离输尿管段，用6号缝合线双重结扎，在两结扎点之间剪断输尿管，确保完全梗阻。
关腹与复苏：清理伤口后分层缝合肌肉层与皮肤，待小鼠清醒后置于洁净笼具中送回饲养室，定期观察动物状态并记录死亡情况。
4.注意事项
1分离输尿管时务必谨慎操作，避免损伤肾脏及周围重要血管。
2手术全程注意无菌操作，术后伤口需妥善清理，防止感染。
- 取材时，取下肾脏后应仔细剥离肾表面残留的结缔组织薄膜，以免干扰后续检测。
图一：分离输尿管并接扎
四．模型评估：
云克隆提供从造模到药效评价的一站式服务，评估体系涵盖四大核心指标：
1. 肾功能指标：检测血清肌酐（Scr）、血尿素氮（BUN）及24小时尿蛋白（UP），客观评估肾功能损伤程度。
2. 组织病理学检查：肾组织经石蜡包埋、切片后进行HE染色观察肾小管损伤与炎症细胞浸润；Masson染色评估胶原沉积面积与间质纤维化程度，是衡量纤维化进展的核心形态学指标。
3. 纤维化标志物检测：Western blot及免疫组化检测肾组织中纤连蛋白（Fibronectin, FN）、胶原蛋白Ⅰ（Collagen I, COL I）、胶原蛋白Ⅲ（Collagen Ⅲ, COL Ⅲ）及α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）的表达水平；采用羟脯氨酸（HP）含量测定，定量反映肾组织胶原蛋白总量，客观衡量纤维化严重程度。
4. 分子机制研究：RT-qPCR检测纤维化相关基因（Col1a1、Col3a1、TGF-β1等）的mRNA表达水平，为靶点发现与机制验证提供分子层面的可靠数据。
图二：肾组织大体照（左：模型组；右:对照组）
图三：肾组织Masson染色图（左：模型组；右:对照组）
五．广泛的应用场景
小鼠肾纤维化模型凭借其病理特征明确、与人类病程高度相似的核心优势，已成为肾病研究领域不可或缺的重要工具。
抗纤维化药物药效评价：UUO小鼠模型是抗肾纤维化药物筛选的金标准体内平台。可设置正常对照组、模型组、阳性药组及受试药各剂量组，通过肾功能指标、组织病理学评分及纤维化标志物表达等多维度参数，系统评估候选化合物的抗纤维化活性、量效关系及安全性。
肾间质纤维化分子机制研究：该模型可用于解析TGF-β/Smad信号通路、炎症-纤维化轴、氧化应激及上皮-间质转化（EMT）等关键分子事件在纤维化启动与进展中的作用，为发现新的干预靶点和生物标志物提供理想载体。
药物肾毒性及安全性评价：借助该模型可在纤维化背景下同步评估药物对肾脏的潜在毒性风险，为候选化合物的临床前安全性评价提供重要依据。
联合用药策略研究：适用于探索抗纤维化药物与抗炎药、抗氧化剂等的联合用药方案，为临床优化治疗策略提供实验支撑。
六．结语
云克隆持有动物防疫条件合格证、大动物实验使用许可证及SPF级大小鼠生产与使用许可证等完备资质，所有模型均严格遵循标准化操作规程，批次间差异小、数据重复性高、结果稳定可靠。基于该模型的科研成果已与国内外众多知名药企及科研机构建立了深度合作关系。
凭借成熟的动物实验平台与专业技术团队，云克隆已建立起涵盖UUO、5/6肾切除以及腺嘌呤诱导等多种方法的小鼠肾纤维化模型体系。从模型构建到药效评价，从组织病理到分子标志物，我们提供全流程一站式服务，为肾脏疾病领域的新药研发提供扎实可靠的数据支撑，助力从科学认知到治疗突破的高效转化。
